코로나바이러스감염증-19 바이러스 대응 실험실 생물안전 가이드

<생물안전평가과 2020.2.6.>

◈ 현재, 코로나바이러스감염증(COVID)-19의 병원성 잠재력 및 전파 역학에       대해 명확하게 밝혀진 바가 없으므로 모든 검체는 잠재적 감염원으로 고려하고        감염성물질 취급 시 노출 위험을 최소화하도록 주의하시기 바랍니다.

1. 생물안전 일반 기준

- 검체 등 감염성물질 취급 시 호흡보호구(N95, KF94 또는 동급 이상의 호흡보호구(PAPR 등)), 전신보호복, 일회용 장갑 등 개인보호구 착용

* 필요시 눈 보호구(고글 또는 안면보호구) 착용

* 불활화 후에는 일회용 가운 착용 가능

- 에어로졸 발생 가능성이 있는 작업은 생물안전작업대(BSC, ClassⅡ이상) 내에서 수행

* 피펫 작업 시 필터가 장착된 팁(filtered tip) 사용

- 원심분리를 위해 bucket 및 rotor에 원심관을 넣거나 빼내는 작업 시에는 물리적 밀폐장비인 safety bucket 및 sealed rotor 등 사용

- 검체 취급 후 오염된 실험대 및 작업대는 적절한 소독제를 사용하여 소독

- 폐기물은 고압증기멸균 등의 처리 후 의료폐기물로 처리

2. 작업별 생물안전 세부 기준

○ 감염성물질을 취급하는 아래의 작업은

생물안전 2등급(Biosafety Level 2, BL2) 수준의 실험실 내 ClassⅡ BSC 내에서 수행

- 검체의 1차 용기 포장(용기 내 주입, 밀봉, 소독) 및 개봉

- 불활화되지 않은 검체를 희석 및 분주하는 작업

- 검체 불활화(핵산 추출용 용해액 또는 불활화제 첨가) 작업

* 불활화된 검체는 생물안전작업대 외부에서 취급 가능

- 바이러스(in vivo 또는 in vitro) 증식을 수반하지 않는 진단·검사 시험

- 감염가능성이 있는 검체로부터 핵산 추출

- 현미경 분석을 위한 화학물질 또는 열 고정 작업 및 준비

- 원심분리를 위해 bucket 및 rotor에 원심관을 넣거나 빼내는 작업

* 원심분리기 사용 시 물리적 밀폐장비인 safety bucket 및 sealed rotor 등 사용

- 불활화되지 않았거나 고정되지 않은 감염된 조직 검체 취급

* 바이러스 농도가 높으므로 BL3 수준의 개인보호구 착용

- 진료 목적 검사, 혈액학적 검사 등의 임상검사 시험

○ 불활화된 검체를 취급하는 아래의 작업은

생물안전 2등급(Biosafety Level 2, BL2) 수준의 실험실에서 수행

- 불활화된 검체를 이용한 분자생물학적, 혈청학적 시험, 생화학적 분석, 항원 검출 시험

- 화학물질 또는 열 고정된 검체의 전자현미경 분석

- 추가 실험이 필요한 이송용 검체의 포장(1차 포장 및 1차 포장용기 소독 완료된 검체 대상)

○ 바이러스 배양 등 병원체를 직접 취급하는 아래의 작업은

생물안전 3등급(Biosafety Level 3, BL3) 실험실에서 수행

- 바이러스 접종, 배양, 분리, 역가 측정, 단백질 정제, 동결건조, 유전자재조합실험 등 살아있는 바이러스를 직접 취급하는 실험

- 바이러스 배양액 또는 바이러스가 감염된 세포(또는 세포 추출물)의 불활화 작업

* 생화화적 분석, 혈청학적 시험, 면역학적 시험 등을 위해 배양된 바이러스의 불활화 작업

(주요 유의사항)

- 눈 보호구 및 N95, KF94 동급 이상의 호흡보호구(PAPR 등) 사용 권고

* 마스크를 사용하는 경우 반드시 밀착 여부 확인

- 취급자는 병원체의 특성 등을 포함한 기관 생물안전지침 숙지 및 준수

- 취급자에 대한 상시 건강 모니터링 및 비상시 사고대응절차 마련

- 감염동물 실험 시 PAPR 또는 동급 이상의 호흡보호구 반드시 착용

- 실험에 사용된 물품은 멸균 등 정해진 절차에 따라 즉시 처리

○ 실험대 및 장비의 소독 작업

- 70% ethanol, 2% glutaraldehyde, sodium hypochlorite(염소농도 0.05%, 500ppm), 일반적인 바이러스 살균제 등 적절한 소독제를 이용

* 환경부에서 허가된 방역용 살균 소독제를 사용할 수 있으며, 제조사에서 제시한 소독제의 희석 배율, 접촉 시간 및 취급 주의사항 등의 권장 사항을 따름

- 감염성물질을 취급한 모든 폐기물은 고압증기멸균 등의 처리 후 폐기물관리법에 따라 의료폐기물로 처리

3. 검체 및 병원체의 포장 및 수송

○ 검체 포장 방법

- 환자 및 의심환자 검체는 카테고리 B 감염성물질 포장기준(UN 포장기준 P650)에 따라 3중 안전포장

- 환자로부터 채취된 검체가 포함된 1차 용기를 소독처리(70% ethanol 등)한 후 라벨 작성

* 병원명, 검체 종류, 채취일, 환자명, 성별, 나이 등의 정보 표기

- 소독 처리된 1차 용기를 흡수제(종이타올 등)로 감싼 후 2차 용기에 넣음

- 2차 용기의 뚜껑을 단단히 잠금 후 3차 용기에 넣음

- 검체 의뢰서를 3차 용기 뚜껑 사이에 넣은 후 포장

- 3차 수송용기 겉면에 보내는 사람, 받는 사람, 응급상황 시 연락처를 반드시 표기 및 UN3373 표식

○ 병원체 포장 방법

- 바이러스 배양액은 카테고리 A 감염성물질 포장기준(UN 포장기준 P620)에 따라 3중 안전포장

* 포장 방법은 감염성물질 안전수송지침(2019, 질병관리본부) 내 카테고리 A 포장 방법(p17) 준수

- 3차 수송용기 겉면에 보내는 사람, 받는 사람, 응급상황 시 연락처를 반드시 표기 및 UN2814 표식

○ 수송 시 유의사항

- 코로나바이러스감염증-19 의심검체 및 병원체 수송 담당자 지정

* 수송담당자는 비상연락망을 유지하고 비상조치 등에 대한 사항을 숙지해야 하며 인수인계절차를 수행

- 감염성물질 안전수송지침(2019, 질병관리본부) 준수

4. 기타 사항

○ 환자로부터의 검체 채취 방법, 검체 운송 중 보관 조건 등은 ‘코로나바이러스감염증-19 확인을 위한 검체 채취 안내서’를 따름

○ 바이러스 배양 및 취급에 대한 기타 세부 사항은 SARS-CoV 및 MERS-CoV 취급 기준을 따름

5. 관련 문의

○ 질병관리본부 생물안전평가과(043-719-8041, 8044, 8057)